金属β内酰胺酶基因blaNDM重组酶聚合酶扩增方法的建立
摘要：
目的 建立一种基于重组酶聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)扩增方法金属β内酰胺酶基因blaNDM的快速检测方法,为广泛耐药菌基因类型的确定提供技术支持.方法 遵照重组酶聚合酶扩增引物和探针设计原则,以blaNDM基因特异性序列为靶基因,设计相应的RPA扩增引物和探针.取梯度稀释已知拷贝数的DNA模板和致病菌核酸样品进行各扩增体系的RPA扩增实验,分析扩增体系的敏感性、特异性和重复性特征以便筛选和评价blaNDM基因的RPA扩增体系.结果 3组扩增体系的引物和探针能够有效的扩增靶基因,检出限达到2×102 copys/反应,与其他细菌样品无非特异性扩增反应,能够在2～7 min内实现靶基因有效扩增.结论 建立了金属β内酰胺酶基因blaNDM的重组酶聚合酶扩增体系,该反应迅速,检出限较低,具有较高的特异性,适用于耐药菌的现场检测.
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doi：
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关键词：
重组酶聚合酶扩增
金属β内酰胺酶基因blaNDM
现场检测技术
广泛耐药菌
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Keyword：
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作者：
屠博文
赵莹
黎俊宏
杜强
毛旭建
唐宏兵
吉俊敏
韩晓冬
王昆
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Author：
Tu Bowen
Zhao Ying
Li Junhong
Du Qiang
Mao Xujian
Tang Hongbing
Ji Junmin
Han Xiaodong
Wang Kun
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作者单位：
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刊名：
卫生研究
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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