链替换技术提高抗角蛋白人Fab抗体的亲和力
摘要：
目的通过链替换技术对一株人源性抗角蛋白Fab单抗进行体外亲和力成熟。方法分离、扩增多样性人免疫球蛋白轻链基因和IgG/IgM重链Fd段基因，分别构建轻链库和重链库。先以原始克隆的重链与轻链库随机搭配进行轻链替换，对形成的换链库采用解离速率筛选法（off-rate selection）选取亲和力提高的克隆；然后再将获得的轻链基因与重链库基因重组进行重链替换，筛选亲和力进一步提高的克隆并进行亲和力测定、可变区基因序列分析等一系列鉴定。结果替换轻链后所获抗体的亲和力提高到原来的10倍；替换重链后亲和力进一步提高达到7.9×1010/mol/L，是原始克隆的近23倍。结论链替换技术是提高抗体库中所获Fab抗体亲和力的有效手段。
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doi：
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关键词：
亲和力成熟
噬菌体抗体库
单克隆抗体
角蛋白
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Keyword：
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作者：
王刚
刘玉峰
王琰
化冰
乔媛媛
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Author：
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作者单位：
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刊名：
中华微生物学和免疫学杂志
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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