利用抑制性减数杂交技术(SSH)研究IL-10抑制表达的新基因
摘要:
目的 利用抑制性减数杂交(SSH)技术筛选IL-10抑制表达的新基因.方法 以PHA刺激的U937细胞为tester,以PHA刺激同时IL-10抑制的U937细胞为driver,提取mRNA,反转录构建cDNA文库,利用SSH技术筛选IL-10抑制表达的新基因.结果 通过SSH技术,发现了15个可能的IL-10抑制表达的基因,其中6个与GenBank中已公布的表达序列检签(expressed sequence tag, EST)片段没有明显同源性,为新基因,其中之一经EST拼接,得到全长cDNA,为一种新的C-C家族趋化因子,已被GenBank收录,收录号码为AF096985.挑选4个新基因进行Northern blot分析,发现IL-10可抑制其中3个新基因表达.结论 SSH技术是一种高效的差异基因筛选方法,IL-10可抑制多种包括新细胞因子基因的表达.
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doi:
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关键词:
白细胞介素10
U937细胞
抑制性减数杂交
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Keyword:
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作者:
韩文玲
李莹
张颖妹
徐秀珍
宋泉声
狄春辉
马大龙
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Author:
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作者单位:
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刊名:
中华微生物学和免疫学杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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