小鼠CD4+记忆性T淋巴细胞的产生、纯化、鉴定及皮肤移植的检测
摘要:
目的 建立CD4+记忆T细胞(memory T lymphocytes,Tm)的免疫磁珠分离方法,并检测其体外部分功能.方法 借助小鼠皮肤移植模型,制备受鼠脾细胞悬液,运用免疫磁珠方法分离CD4+Tm,用台盼蓝染色法和流式细胞仪检测分选所得细胞的活性和纯度,并在体外用ELISPOT技术检测其不同抗原刺激时IFN-γ活性分泌频数.结果 小鼠皮肤移植皮片平均存活时间为(13.6±0.9)d;分离所得CD4+Tm的活细胞百分率为(98.4±0.7)%;流式细胞术检测表型,其中CD4+CD8-细胞比例占(96.06±2.49)%,CD44+CD62L-细胞比例占(94.13±2.36)%,CD4+CCR7-细胞比例占(96.39±1.93)%;在无刺激物作用或者大鼠脾细胞、供体脾细胞、刀豆素A等刺激物作用时,IFN-γ活性分泌频数分别为3±1、6±3、339±14、108±9个/104,差异有统计学意义.结论 通过小鼠皮肤移植模型及免疫磁性分离技术,可制备高纯度无菌的CD4+Tm,其细胞活力不受影响,作用具有良好的供体特异性.这为深入研究Tm在移植物免疫方面的作用提供了技术资料.
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doi:
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关键词:
记忆T细胞
免疫磁性分离
流式细胞术
酶联免疫斑点技术
移植
小鼠
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Keyword:
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作者:
朱鹏
陈义发
李丹
陈孝平
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Author:
ZHU Peng
CHEN Yi-fa
LI Dan
CHEN Xiao-ping
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作者单位:
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刊名:
中华微生物学和免疫学杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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