人tau蛋白外显子2和外显子3特异性抗体的制备

摘要:

目的 制备人微管相关蛋白tau N端的外显子2和外显子3特异性多克隆抗体.方法 从人外周血DNA中获得tau蛋白外显子2及外显子3序列并连接至原核表达载体pGEX-2T,表达纯化重组融合蛋白GST-E2、GST-E3;以此融合蛋白免疫家兔及小鼠制备抗血清,通过ProteinG/A、偶联GST蛋白的溴化氰(CNBr)活化柱对抗血清进行亲和纯化;用Western Blot及ELISA方法确定所制备抗体的特异性和敏感性.结果 在大肠埃希菌中表达纯化出人tau外显子2和外显子3重组融合蛋白GST-E2和GST-E3,相对分子质量为29×103.免疫实验动物后获得抗血清,经系列纯化后Western Blot和ELISA检测显示,制备的抗人tau蛋白外显子2和外显子3抗体具有良好的特异性和免疫反应效价.结论 成功制备了4种人tau外显子2和外显子3特异性抗体,为进行tau蛋白在神经退行性疾病中的作用研究提供了基础.

Abstract:

  • doi:
  • 关键词: 蛋白质类 外显子 抗体 病毒 朊病毒病
  • Keyword: Proteins Exons Antibodies viral Prion diseases
  • 作者: 陈操 王桂荣 石琦 张宝云 梅国勇 李媛 王新 周瑞敏 韩俊 赵玉军 董小平
  • Author: CHEN Cao WANG Gui-rong SHI Qi ZHANG Bao-yun MEI Guo-yong LI Yuan WANG Xin ZHOU Rui-min HAN Jun ZHAO Yu-jun DONG Xiao-ping
  • 作者单位:
  • 刊名: 中华实验和临床病毒学杂志
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