人tau蛋白外显子2和外显子3特异性抗体的制备
摘要:
目的 制备人微管相关蛋白tau N端的外显子2和外显子3特异性多克隆抗体.方法 从人外周血DNA中获得tau蛋白外显子2及外显子3序列并连接至原核表达载体pGEX-2T,表达纯化重组融合蛋白GST-E2、GST-E3;以此融合蛋白免疫家兔及小鼠制备抗血清,通过ProteinG/A、偶联GST蛋白的溴化氰(CNBr)活化柱对抗血清进行亲和纯化;用Western Blot及ELISA方法确定所制备抗体的特异性和敏感性.结果 在大肠埃希菌中表达纯化出人tau外显子2和外显子3重组融合蛋白GST-E2和GST-E3,相对分子质量为29×103.免疫实验动物后获得抗血清,经系列纯化后Western Blot和ELISA检测显示,制备的抗人tau蛋白外显子2和外显子3抗体具有良好的特异性和免疫反应效价.结论 成功制备了4种人tau外显子2和外显子3特异性抗体,为进行tau蛋白在神经退行性疾病中的作用研究提供了基础.
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doi:
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关键词:
蛋白质类
外显子
抗体
病毒
朊病毒病
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Keyword:
Proteins
Exons
Antibodies
viral
Prion diseases
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作者:
陈操
王桂荣
石琦
张宝云
梅国勇
李媛
王新
周瑞敏
韩俊
赵玉军
董小平
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Author:
CHEN Cao
WANG Gui-rong
SHI Qi
ZHANG Bao-yun
MEI Guo-yong
LI Yuan
WANG Xin
ZHOU Rui-min
HAN Jun
ZHAO Yu-jun
DONG Xiao-ping
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作者单位:
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刊名:
中华实验和临床病毒学杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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页码: