实时荧光定量RT-PCR监测恒河猴体内人/猴免疫缺陷病毒载量在传代过程中的变化
摘要:
目的 为分析中国SHIV/猕猴AIDS模型的病毒载量变化趋势,建立一种实时、灵敏、特异的针对人/猴免疫缺陷病毒的定量检测方法.方法 体外转录制备RNA标准品,利用TaqMan EZRT-PCR试剂盒的反应体系和针对SHIV gag保守区91个碱基的TaqMan探针和引物,建立一步法实时荧光定量RT-PCR.提取126份来自SHIV-CN97001感染恒河猴血浆病毒RNA并定量检测.结果 利用梯度稀释的RNA标准品对反应体系进行优化,标准曲线下限达到2×102 拷贝/ml,相关性(r>0.99)及重复性(CV=4.14%)均能达到测定要求.病毒载量的检测结果表明SHIV-CN97001在猴体内传代过程中病毒载量有先升后降的趋势,病毒载量通常在接种病毒或感染猴的全血后第14天达到高峰.血浆载量可达到105~106 拷贝/ml.结论 成功地建立了一步法定量SHIV RNA的实时荧光定量RT-PCR,为SHIV/恒河猴AIDS模型的建立与应用提供了灵敏的病毒载量检测方法.SHIV-CN97001的体内繁殖能力在猴体内传代过程中有所增强.
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doi:
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关键词:
逆转录聚合酶链反应
SIV
病毒载量
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Keyword:
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作者:
刘强
李菊
杨贵波
邢辉
代解杰
邵一鸣
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Author:
LIU Qiang
LI Ju
YANG Gui-bo
XING Hui
DAI Jie-jie
SHAO Yi-ming
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作者单位:
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刊名:
中华实验和临床病毒学杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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