新型重组人IFN-λ2的高效表达、纯化与抗病毒活性研究

摘要:

目的在大肠埃希菌中高效表达重组人干扰素-λ2(rhIFN-λ2),并对其抗病毒活性进行初步研究.方法根据大肠埃希菌的偏爱密码子人工设计合成人干扰素-λ2(hIFN-λ2)的高表达基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,在大肠埃希菌中进行表达,表达产物经变性、复性、阳离子交换层析及分子筛层析纯化,测定其抗病毒活性、种属特异性及抗HBV活性.结果在大肠埃希菌表达的目的蛋白占细胞总蛋白量的15%左右,纯化后的纯度达到90%以上,在WISH细胞上抗VSV活性约为1.5×106 IU/mg.与rhIFN-α2b比较,表达产物在非灵长类细胞上的抗病毒活性较在灵长类细胞上弱,目的蛋白在HepG2.2.15细胞上表现有与rhIFN-α2b相似的抗HBV活性.结论hIFN-λ2可以在大肠埃希菌内实现高效表达,表达产物具有抗病毒活性,有与rhIFN-α2b相似的抗HBV活性,本型IFN有较严格的种属特异性.

Abstract:

  • doi:
  • 关键词: 干扰素类 抗病毒药
  • Keyword:
  • 作者: 王刚 李武平 张成海 衣作安 郑丽舒 张辉 段招军 侯云德
  • Author: WANG Gang LI Wu-ping ZHANG Cheng-hai YI Zuo-an ZHENG Li-shu ZHANG Hui DUAN Zhao-jun HOU Yun-de
  • 作者单位:
  • 刊名: 中华实验和临床病毒学杂志
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