以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒的构建
摘要：
目的：构建以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒用于药物作用机制的快速鉴别。方法通过使用分泌型荧光素酶（Gluc）序列替代流感病毒 HA基因，并利用表达质粒反式提供 HA蛋白，借助甲型流感病毒 WSN反向遗传学产毒系统，构建带有报告系统的单轮感染流感病毒。结果首轮接种单轮感染流感病毒的细胞上清中可以检测到 Gluc信号，但检测不到病毒滴度，而在第二轮感染的细胞上清中检测不到 Gluc信号，表明该单轮感染病毒在感染过程中能够分泌 Gluc蛋白并且不能产生具有感染性的子代病毒颗粒。通过对复制动力学和时相的观察，明确了单轮感染病毒的生活周期，同时结合4种已知作用机制的抗流感药物的阻断实验结果，证明该系统可以用来快速、有效地鉴别药物的作用机制。结论成功构建了以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒，该系统可以用于抗病毒药物作用机制的快速鉴别。
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doi：
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关键词：
流感病毒 A型
药物评价
临床前
单轮感染病毒
Gluc报告基因
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Keyword：
Influenza A virus
Drug evaluation
preclinical
Single-cycle infectious virus
Gluc reporter
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作者：
张永欣
赵斐
王臻
张瑞欣
周金明
岑山
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Author：
ZHANG Yong-xin
ZHAO Fei
WANG Zhen
ZHANG Rui-xin
ZHOU Jin-ming
CEN Shan
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作者单位：
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刊名：
中国医药生物技术
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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