人β2-微球蛋白基因的克隆与原核中的表达
摘要：
本研究获取主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子的轻链部分,即β2-微球蛋白(β2m)以制备MHC Ⅰ类分子-肽四聚体.根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从人白细胞中克隆β2m的基因,并构建β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达.结果显示:构建的编码成熟β2m的pET-β2m可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达β2m,表达量占菌体总蛋白的32%,β2m以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以Sephacryl S-200HR(S-200)柱层析纯化,纯度可达95%以上,纯化产物采用稀释法复性.Western blot分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性.结论:获得了高效表达人β2m的大肠杆菌工程菌株,建立了简便有效的β2m包涵体纯化、复性方法,为制备MHC Ⅰ类分子-肽四聚体奠定了基础.
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doi：
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关键词：
β2-微球蛋白
MHCⅠ类分子
基因表达
基因克隆
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Keyword：
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作者：
孙万军
徐东刚
杜建芳
邹民吉
王金凤
蔡欣
王嘉玺
艾辉胜
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Author：
SUN Wan-Jun
XU Dong-Gang
DU Jian-Fang
ZOU Min-Ji
WANG Jin-Feng
CAI Xin
WANG Jia-Xi
AI Hui-Sheng
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作者单位：
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刊名：
中国实验血液学杂志
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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页码：