大鼠睾丸支持细胞的分离、纯化和鉴定
摘要:
目的 培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞,并应用检测ABP mRNA原位杂交方法加以鉴定.方法 选用18~22d龄SD雄性大鼠睾丸,采用0.25%胰蛋白酶、0.1%透明质酸酶、 0.1%胶原酶三酶依次消化法分离支持细胞,置于32℃ 5% CO2的培养箱培养,48h后用20mmol/L Tris-HCl低渗处理培养细胞.培养1周后应用伊红染色、吖啶橙荧光染色、Feulgen染色对所培养的支持细胞进行鉴定,同时应用原位杂交检测ABP mRNA方法鉴定分离培养的支持细胞.结果 培养1周后所获培养的支持细胞纯度达95%以上.分离培养的支持细胞ABP mRNA表达阳性,其形态结构特征与用其他方法鉴定为支持细胞的形态结构特征一致.结论 采用三酶连续消化及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高,而且应用原位杂交方法检测ABP mRNA是一种新的、特异、有效的鉴定支持细胞及其功能的方法.
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doi:
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关键词:
分离
鉴定
支持细胞
原位杂交
大鼠
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Keyword:
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作者:
黄东晖
赵虎
田永红
熊承良
王玲
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Author:
HUANG Dong-hui
ZHAO Hu
TIAN Yong-hong
XIONG Cheng-liang
WANG Ling
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作者单位:
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刊名:
解剖学报
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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