GST-snail融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
摘要：
目的制备snail多克隆抗体,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具.方法PCR扩增编码人snail 264个氨基酸的cDNA全长片段,DNA重组入原核表达质粒pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半糖苷(IPTG)诱导表达GST/Snail融合蛋白.经电泳纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清.通过ELISA、免疫荧光和免疫印迹法鉴定血清特异性和效价.结果成功构建了pGEX-4T-1/snail原核表达载体,转化BL2l后可高效表达融合蛋白GST-snail,免疫产生的snail多抗可特异检测snail真核表达载体转染COS-7细胞后snail的表达及定位情况.结论获得了效价和特异性都良好的snail抗体,适合对snail的检测应用.
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doi：
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关键词：
Snail
融合蛋白
多克隆抗体
免疫荧光染色
免疫印迹法
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Keyword：
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作者：
王冰晶
张志谦
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Author：
WANG Bing-jing
ZHANG Zhi-qian
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作者单位：
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刊名：
解剖学报
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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