目的 研究人卵母细胞和胚胎在不同降温速率下细胞内外冰晶形成的规律,进一步解析其低温生物学特性,为开发合适的低温保存方案提供依据. 方法 将临床废弃卵母细胞和胚胎在包含1 mol/L的乙二醇和植冰剂Snomax(10mg/L)PBS溶液中培养15 min后,放置在低温显微镜下观察.通过设定不同的降温程序,实时记录细胞内外冰晶形成的过程. 结果 细胞外冰晶形成的温度为-(7.4±0.3)℃.当降温速率为-0.5℃/min时,人卵母细胞和胚胎细胞内均未有细胞内冰晶的形成;当降温速率分别为-2℃/min、-4℃/min、-8℃/min、-20℃/min时,人卵母细胞和胚胎的细胞内冰晶形成的温度分别为-(26.9±12.3)℃、-(26.2±12.0)℃;-(25.0±8.6)℃、-(20.4±6.3)℃以及-(23.0±6.5)℃、-(19.2±6.3)℃;-(25.4±8.4)℃、-(19.1±5.5)℃.桑椹胚细胞内冰晶形成有两种特点:卵裂球同时且均匀的形成冰晶或者单个卵裂球、一组卵裂球依次形成冰晶. 结论 卵母细胞细胞内冰晶形成的温度(-25.0℃)更低于胚胎(-20.4℃),且人卵母细胞细胞内冰晶形成的温度域宽且分散,而胚胎细胞内冰晶形成的温度域窄且集中.