表达Cre酶复制缺陷型重组腺病毒载体的构建及鉴定
摘要:
目的构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择.方法用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载体;Western blot方法鉴定Cre蛋白的表达.结果在大肠杆菌内构建出重组腺病毒质粒,在包装细胞系内包装出重组病毒颗粒;测定病毒滴度为106pfu/L;重组病毒在细胞内表达Cre蛋白.结论表达Cre酶的重组腺病毒载体构建成功,阳性重组质粒的鉴定方法得以改进,为进一步的体细胞Cre-loxP条件性基因敲除提供了基础.
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doi:
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关键词:
Cre重组酶
Cre-loxP条件性基因打靶
腺病毒载体
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Keyword:
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作者:
段素素
张云
杨帆
王颖
李文辉
王树惠
刘力
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Author:
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作者单位:
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刊名:
基础医学与临床
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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