鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要:

为了建立可同时检测鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)和锦鲤疱疹病毒(Kio herpesvirus,KHV)的检测方法,本研究根据CEV P4a基因保守序列,对英国环境、渔业水产养殖研究中心(Center for Environment,Fisheries and Aquaculture Science,CEFAS)设计合成的引物序列进行优化,合成1对特异性引物和1条用FAM荧光基团标记的TaqMan探针;根据KHV ORF7基因保守序列,设计筛选1对特异性引物和1条用VIC荧光基团标记的Taq-Man探针.优化反应条件,建立了CEV和KHV双重实时荧光定量PCR检测方法.结果显示该方法特异性强,与其它水生动物病毒无交叉反应;灵敏度高,对CEV和KHV的检测限均为15拷贝数/μL;组内重复与组间重复的平均变异系数小于3%.本研究建立的方法具有快速、特异、敏感等优点,可用于CEV和KHV的快速检测.

Abstract:

  • doi:
  • 关键词: 鲤浮肿病毒(CEV) 锦鲤疱疹病毒(KHV) 双重实时荧光定量PCR
  • Keyword:
  • 作者: 张文 徐立蒲 吕晓楠 王小亮 曹欢 王姝 王静波
  • Author: ZHANG Wen XU Lipu LYU Xiaonan WANG Xiaoliang CAO Huan WANG Shu WANG Jingbo
  • 作者单位:
  • 刊名: 病毒学报
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