基于12S序列的蛤蚧LAMP快速鉴定方法

摘要:

蛤蚧为我国名贵动物中药材,为建立蛤蚧的LAMP可视化检测方法,实现其与混伪品的高效特异鉴别,该研究通过MEGA 6.0分析蛤蚧与其13种混伪品共65条12S rRNA序列,在线设计LAMP引物,并优化扩增条件,考察反应灵敏度,对蛤蚧及其混伪品进行鉴别验证.结果表明,基于12S rRNA序列的蛤蚧及其13种混伪品均可通过BLAST比对准确区分.蛤蚧12S rRNA序列较为保守,10批次30条序列在引物设计区仅含2条单倍型和3个变异位点,成功设计了6条LAMP特异引物.64℃反应1h,80℃灭活5 min,即可完成蛤蚧的可视化检测,最低检测浓度为5μg·L-1,高于传统PCR 2个数量级.该方法特异性强、灵敏度高、检测方便、反应时间短,且闭管操作,避免了污染,可实现蛤蚧与混伪品的快速可视化鉴别.

Abstract:

  • doi:
  • 关键词: 蛤蚧 12S LAMP 快速鉴定
  • Keyword:
  • 作者: 苏燕燕 邬兰 丁丹丹 马婷玉 杨俐 向丽 薛建平
  • Author: SU Yan-yan WU Lan DING Dan-dan MA Ting-yu YANG Li XIANG Li XUE Jian-ping
  • 作者单位:
  • 刊名: 中国中药杂志
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