基于12S序列的蛤蚧LAMP快速鉴定方法
摘要:
蛤蚧为我国名贵动物中药材,为建立蛤蚧的LAMP可视化检测方法,实现其与混伪品的高效特异鉴别,该研究通过MEGA 6.0分析蛤蚧与其13种混伪品共65条12S rRNA序列,在线设计LAMP引物,并优化扩增条件,考察反应灵敏度,对蛤蚧及其混伪品进行鉴别验证.结果表明,基于12S rRNA序列的蛤蚧及其13种混伪品均可通过BLAST比对准确区分.蛤蚧12S rRNA序列较为保守,10批次30条序列在引物设计区仅含2条单倍型和3个变异位点,成功设计了6条LAMP特异引物.64℃反应1h,80℃灭活5 min,即可完成蛤蚧的可视化检测,最低检测浓度为5μg·L-1,高于传统PCR 2个数量级.该方法特异性强、灵敏度高、检测方便、反应时间短,且闭管操作,避免了污染,可实现蛤蚧与混伪品的快速可视化鉴别.
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doi:
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关键词:
蛤蚧
12S
LAMP
快速鉴定
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Keyword:
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作者:
苏燕燕
邬兰
丁丹丹
马婷玉
杨俐
向丽
薛建平
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Author:
SU Yan-yan
WU Lan
DING Dan-dan
MA Ting-yu
YANG Li
XIANG Li
XUE Jian-ping
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作者单位:
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刊名:
中国中药杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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