缺血再灌注损伤脑微血管内皮细胞Necroptosis模型的建立
摘要：
目的:采用拟缺血再灌注损伤结合z-VAD-FMK(Benzyloxyearbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone,z-VAD-FMK)干预,探索一种脑微血管内皮细胞(Brain Microvascular Endothelial Cells,BMECs)Necroptosis模型.方法:首先利用原代大鼠脑微血管内皮细胞,采用氧糖剥夺及复氧复糖方法,筛选出拟缺血再灌注损伤时间点.在拟缺血再灌注模型基础上,予Casepase抑制剂z-VAD-FMK 20 μmol/L干预,采用CCK-8检测细胞活性;透射电镜观察细胞超微结构;Annexin V-FITC/PI(Propidium Iodide)双染色法检测细胞死亡方式.结果:确定氧糖剥夺2 h复氧复糖8 h,作为拟缺血再灌注时间点;z-VAD-FMK作用于拟缺血再灌注损伤BMECs后,细胞活性无统计学意义;z-VAD-FMK干预组在电镜下呈现明显的Necroptosis特征;流式检测显示,各象限细胞比率无明显变化,但Necroptosis特异性抑制剂Nec-1可显著降低Q2象限细胞比率,提示z-VAD-FMK干预抑制了细胞晚期凋亡,诱导了Necroptosis的发生.结论:z-VAD-FMK可诱导拟缺血再灌注脑微血管内皮细胞发生Necroptosis,为以后研究缺血性脑中风necroptosis机制提供了细胞实验模型.
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doi：
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关键词：
脑微血管内皮细胞
Necroptosis
z-VAD-FMK
缺血再灌注损伤
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Keyword：
Brain microvascular endothelial cells
Necroptosis
z-VAD-FMK
Ischemia-reperfusion injury
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作者：
胡艳红
雷洪涛
王淑艳
于雪
张赛
苏靖
马家宝
姜昭妍
张凡
万亮琴
臧妍妍
李芳赫
李卫红
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Author：
Hu Yanhong
Lei Hongtao
Wang Shuyan
Yu Xue
Zhang Sai
Su Jing
Ma Jiabao
Kang Soyeon
Zhang Fan
Wan Liangqin
Zang Yanyan
Li Fanghe
Li Weihong
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作者单位：
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刊名：
世界中医药
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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页码：