应用SYBR GreenⅠ荧光PCR方法快速检测溶藻弧菌

摘要:

目的 利用SYBR Green Ⅰ荧光PCR反应方法建立一种准确、快速、便捷检测溶藻弧菌的方法.方法 根据溶藻弧菌toxR基因保守区域设计引物,建立检测溶藻弧菌SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法,利用8株溶藻分离株以及26株其他种属细菌进行特异性和灵敏度评价.利用含不同溶藻弧菌基因组拷贝数(自2×106拷贝/μl至2×100拷贝/μl)的样品进行灵敏度评价.同时,对平行样品分别应用普通PCR法和TaqMan探针实时PCR法进行检测,并对3种检测方法的特异度及灵敏度进行比较.结果 基于toxR基因的SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测对全部8株溶藻弧菌检测为阳性,检测下限为2×101拷贝/μl,而26株其他种属细菌均为阴性.与普通PCR法和TaqMan探针实时PCR法比较,SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法灵敏度更高.结论 用toxR基因作为靶基因检测溶藻弧菌的单重SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法,提升了检测速度,有良好的实际应用前景.

Abstract:

  • doi:
  • 关键词: 溶藻弧菌 SYBR GreenⅠ荧光PCR toxR基因
  • Keyword: Vibrio alginolyticus SYBR green Ⅰ-based real-time PCR assay toxR gene
  • 作者: 李杰 卢昕 徐嘉良 阚飙
  • Author: LI Jie LU Xin XU Jia-liang KAN Biao
  • 作者单位:
  • 刊名: 中国预防医学杂志
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