实时荧光定量聚合酶链反应检测血清2型猪链球菌的研究
摘要:
目的 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(Real.time PCR)技术,建立针对血清2型猪链球菌的快速检测方法.方法 针对血清2型猪链球菌的csp2J基因序列,应用Beacon Designer 7.0,设计了引物和TaqMan-MGB探针,建立Real-time PCR检测方法;把目的 片段克隆到pMD18-T载体制作标准曲线;以常见致病菌及条件致病菌验证引物探针的特异性;制备血液模拟标本评价本方法在临床标本中的应用.结果 由标准曲线可知该方法可以检测到100拷贝/反应体系的目的 基因,特异性检测显示只有血清2型猪链球菌有荧光信号,其他常见致病菌及条件致病菌均无荧光信号,血液模拟标本中3.9×10<'2>cfu/ml的细菌含量可被检出.结论 以csp2J为目的 基因建立的血清2型猪链球菌Real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性好、快速,可用于临床感染患者标本的初步筛查.
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doi:
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关键词:
猪链球菌
Real-time PCR
TaqMan-MGB探针
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Keyword:
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作者:
白雪梅
张少敏
孙晖
叶长芸
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Author:
BAI Xue-mei
ZHANG Shao-min
SUN Hui
YE Chang-yun
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作者单位:
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刊名:
疾病监测
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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