硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平对子痫前期孕妇VEGF表达和miR-26a-5p的影响

　　硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平对子痫前期孕妇VEGF表达和miR-26a-5p的影响

　　夏丹 巴中市中心医院妇产科，四川巴中636000

　　摘要：目的分析硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平对子痫前期孕妇血管内皮生长因子( VECF)和microRNA-26a-5p(miR-26a-5p)的影响，探讨硫酸镁、酚妥拉明、硝苯地平治疗子痫前期的疗效机制。方法选取2015年1月-2016年1月巴中市中心医院收治的子痫前期孕妇69例为观察组;选取同期健康孕妇70例为对照组。两组受试者入组前均抽取静脉血行血清VEGF水平检测，观察血浆miR-26a-5p表达情况。观察组患者采用硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平进行治疗。比较两组受试者血清VEGF水平、血浆miR-26a-5p表达情况;比较观察组患者治疗前后血清VEGF水平、血浆miR-26a-5p表达情况。结果两组受试者在年龄、体重、身高、体质量指数( BMI)、孕周方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者入组前血清VEGF水平明显低于对照组，血浆miR-26a-5p明显高于对照组(P<0.05);观察组患者完成治疗周期后，血清VEGF水平较治疗前明显提高，血浆miR-26a-5p表达较治疗前明显降低(P<0.05)。结论硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平能够改善子痫前期孕妇血清VEGF和血浆miR-26a-5p的表达情况，是治疗子痫前期孕妇的可能机制。

　　关键词：子痫前期孕妇;血管内皮生长因子;microRNA-26a-5p;硫酸镁;酚妥拉明;硝苯地平

　　中国图书分类号：R714.14文献标识码：A文章编号：10014411(2018)11-2435-03;doi:10. 7620/zgfybj.j.issn.1001-4411. 2018.11.12

　　子痫前期是以高血压为主，伴随一系列症状体征的综合征。子痫前期进一步发展可进展为子痫。美国的统计数据显示，妊娠期高血压发病率在12u/0~22%，临床17. 6%孕产妇死亡原因与妊娠高血压相关。我国目前尚无官方统计的妊娠高血压发病率及相关死亡率数据，但部分多中心的文献显示，妊娠期高血压疾病发病率为50/0~8% [2-3]。子痫前期对孕妇及胎儿的结局具有较高的危险性，是妊娠期需要加强防控的妊娠并发症。目前，临床对于子痫前期的发病机制尚不明确，临床治疗以降低血压、预防孕妇抽搐等措施为主。硫酸镁是预防抽搐的主要药物。酚妥拉明是仪肾上腺素受体阻滞药，可有效扩张血管。硝苯地平是钙拮抗剂，具有非常强的扩张冠状动脉和周围血管的作用。硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平三药联用治疗子痫前期孕妇是临床证实有效的治疗方案[4-5]。本研究分析三药联用对治疗子痫前期孕妇血管相关指标改善情况，探讨其治疗的有效机制，为临床子痫前期孕妇的预防提供参考。

　　1 资料与方法

　　1.1 资料来源 选取2015年1月-2016年1月巴中市中心医院收治的子痫前期孕妇69例为观察组。纳入标准：①符合全国高血压项目工作组制定的子痫前期诊断标准：妊娠20周后首次出现收缩压≥140 mmHg或舒张压≥90 mmHg，尿蛋白≥0.3 g/24 h;②妊娠20~30周;③初产妇;④无高危妊娠指征如，心、肝、肾、肾上腺皮质功能不全等;⑤无影响血清VEGF、血浆miR-26a-5p水平的其他疾病;⑥孕妇及家属了解参加此次研究的利弊，并签署知情同意书。观察组轻度子痫前期30例，中度28例，重度1 1例;收缩压( 146.5±6.6)rnmHg，舒张压(95.7±5.2) mmHg;24h尿蛋白水平(0. 33+0. 13) g/24 h。选取同期健康孕妇70例为对照组。两组受试者年龄、体重、身高、体质量指数( BMI)、孕周比较差异无统计学意义，具有可比性(P>0.05)。两组受试者临床基线资料比较见表1。

　　表1两组受试者临床基线资料比较(i±s)

　　1.2方法两组受试者入组前均抽取静脉血行血清VFGF水平检测和血浆miR-26a-5p表达情况;观察组患者采用硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平进行治疗。完成治疗后采集静脉血检测血清VEGF、血浆miR- 26a - Sp的表达情况，比较两组受试者血清VEGF水平和血浆miR-26a-5p表达情况;比较观察组患者治疗前后血清VEGF'水平、血浆miR-26a-5p表达情况。

　　1.2.1 治疗方法 观察组患者入组后，常规给予降压、镇静治疗，必要时利尿、扩容治疗。口服硝苯地平缓释制片’(Ⅱ) (青岛黄海制药有限责任公司生产，国药准字H31022750)，初始剂量为20 mg/次，治疗期间测量血压，血压控制在105 mmHg，根据降压效果调整剂量，大剂量为60 mg/次，1次/d，日服大剂量不超过120 mg，空腹整粒吞服，不得嚼碎或掰开服用。静脉滴注酚妥拉明注射液(华润双鹤药业股份有限公司生产，国药准字H11020664，规格：1 ml：10 mg，取10 mg溶解于5%的GS溶液100 ml中，静脉滴注，1次/d，连续使用7d)和硫酸镁注射液(成都倍特药业有限公司生产，国药准字H32023414，规格：10 ml：1 g，4~6 g的负荷剂量溶解于5%的GS溶液100 ml中，静脉点滴15~20 min后，再予以2g/h静脉持续滴注，1次/d，连续使用7d)，3种药物均以连续1周为1个疗程。

　　1.2.2血清VEFG测量 血清标本的收集：孕妇在取样室休息15 min，抽取肘静脉血5ml，室温放置30 min，再置于-4℃冰箱中过夜，取出置于离心管中，3 000 r/min离心10 min，吸取上血清作为待测标本。所有标本测试前置于-80℃冰箱保存。待标本收集完成后，采用酶联免疫法测定血清中VEGF水平，采用BIO - RAD公司生产的iMak TM酶标仪和Bioscience公司生产的Human VEGF -A PlatinumELISA试剂盒测试。严格按照试剂盒说明书和酶标仪操作说明书操作，采用Cllj-Vf Fxpert l.3 F.LISA分析软件分析检测结果，计算血清中VEF(;水平。

　　1.2.3血浆miR-26a-5p表达测试 孕妇在取样室休息15 min，抽取肘静脉血Sml，室温放置30 min，再置于-4℃冰箱中过夜，取出置于离心管中，3 000 r/min离心10 min，倾去上清液，收集下层血浆作为待测标本。血浆组织总RNA提取采用TRIzol法( In - vitrogen)，参考试剂说明书进行操作，采用ABI-Vii A 7 Detection System荧光定量PCR仪行定量分析，对miR - 26a - 5p循环参数设为95℃30 s;95℃3 s，60℃34 s，共44个循环，以7 500 Soft-ware 2.0.6进行扩增和熔解曲线分析。m1R-26a-5p相对表达量分析参考文献计算。

　　1.3 统计学分析采用SPSS 18.0统汁软件对数据进行统计学分析，计数资料采用疋2检验，等级计数资料采用秩和检验，计量资料采用(x+s)表示，行采用f检验，P<o. p="" 05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1 两组受试者血清VEGF、血浆miR-26a-5p水平比较观察组患者入组前血清VFCF明显低于对照组，血浆miR-26a-5p明显高于对照组(Jp<0.05)。见表2。

　　表2两组受试者血清VFJCF、血浆miR-26a-5p水平比较(i±s)

　　2.2 观察组治疗前后血清VF.GF、血浆miR-26a-5p水平比较观察组患者完成治疗周期后，血清VECF较治疗前明显提高，血浆miR-26a-5p表达较治疗前明显降低(P<0.05)。见表3。

　　表3观察组治疗前后血清VECF、m浆miR-26a-5p水平比较

　　3讨论

　　子痫前期是妊娠期女性特有的高血压疾病，其主要临床特征是孕周20周后出现血压升高、尿蛋白和水肿，其病理表现为全身或者局部发生小动脉痉挛，周围血管阻力增加，器官组织的血流灌注减少。若子痫前期孕妇的病情得不到有效控制，发展到孕中期常会出现脏器、组织的损害，对围生儿的生长产生阻碍，严重甚至发展为宫内窘迫，导致母儿妊娠结局不良，是目前临床威胁母儿健康的重要原因之一。目前，临床对子痫前期的病因尚无定论，较为可靠的说法主要有以下几种学说：①滋养细胞异常入侵学说;②母胎界免疫耐受异常学说;③血管内皮损伤学说;④胰岛素抵抗及遗传因素学说。虽然这些学说都得到不同程度的临床研究证实，但是否只限于上述病机临床并无定论。因此，分析子痫前期发生的可能机制，为临床预防子痫前期的发生措施制定提供参考，对孕期健康的保障具有重要意义[9-10]。

　　子痫前期孕妇的临床症状会随着妊娠的结束而显著改善。分析孕期器官、组织的变化，胎盘的变化明显，因此，临床很多文献研究的着眼点以胎盘为主。其中胎盘血管重铸功能及滋养细胞侵袭障碍被认为是目前较为确切的导致子痫前期的关键病机，这在部分临床研究中得到证实。VEGF作为一种细胞特异性的肝素结合生长因子是现今已知为有效的促进血管生成的细胞因子之一。VEGF通过与相应受体结合能促进机体内各种内皮细胞进行分裂，刺激血管内皮细胞增殖、迁移和新生血管管状结构的生成，还能增强血管内皮细胞的通透性。子痫前期孕妇血清中的VEGF明显低于症状妊娠妇女，相应地降低了VEGF扩血管的作用，导致母体子痫前期的水肿、蛋白尿等临床症状。

　　有研究显示，子痫前期女性和孕妇中的mi-croRNA表达差异有统计学意义。说明microRNA可能参与了子痫前期的发生发展。Suh等[14]对比正常和子痫前期孕产妇胎盘组织中microRNA表达时发现，miR-26a在重症子痫前期孕产妇的胎盘组织中表达较正常孕妇显著升高，而miR-26a-5P是成熟miR-26a中较为重要的成熟片段。说明miR-26a-5P在血浆中的表达与子痫前期的发生显著相关。

　　本文结果显示，观察组患者人组前血清VEGF明显低于对照组，血浆，miR - 26a - 5p明显高于对照组(P<0.05);观察组患者完成治疗周期后，血清VEGF较治疗前明显提高，血浆miR-26a-5p表达较治疗前明显降低(P<0.05)。说明，血清中的VEGF和血浆中的miR-26a-5P表达与子痫前期密切相关，与相关研究[15]结果一致。

　　综上所述，硫酸镁、酚妥拉明联合硝苯地平通过改善子痫前期孕妇的血清VEGF和血浆miR-26a-5p表达是治疗子痫前期孕妇的可能机制。重视孕妇血管相关疾病的防治可能对降低孕妇发生子痫前期具有一定的临床价值。

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