孕激素动态监测在孕早期胚胎发育诊断中的应用价值分析

　　孕激素动态监测在孕早期胚胎发育诊断中的应用价值分析

　　朱峻峰，周文婷，孙丹 宜昌市妇幼保健院妇产科，湖北宜昌443003

　　摘要：目的分析孕激素动态监测在孕早期胚胎发育诊断中的应用价值，为临床防治异位妊娠、先兆流广：等。hj况提供参考。方法选取2016年1月-2017年5月在新昌县人民医院就诊的50例早期胚胎发育终止的孕妇作为研究组，另选择㈦期往本院接受人工流产的50例正常早孕妇为对照组，应用化学发光免疫分析法对两组孕妇的血清催乳素( PRL)、孕酮及雌：醇(E!)表达水平进行检测;并采用免疫组化法对早孕蜕膜内PRL、孕酮及E。的相关受体[催乳素受体(PRI.H)、蛋|『|质受体(I'I{)、内质网驻留蛋白(ER)]进行测定，所有操作均严格参照说明抒进行。结果研究组孕妇的Om内I'R1.、孕酮、r，表达水平ll点著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);两组孕妇的蜕膜腺体、间质细胞的胞浆内均存在PRLR、PR及IcR堂l'I阳性表达，且研究绀孕妇的蜕膜组织内PRLR、PR及ER蛋白表达水平显著低于对照组，差异有统计学意义(，’<0.05).结论维持孕早期孕妇的血清PRL、孕酮及E，表达水平正常并维持孕早期蜕膜组织内PRLR、PR、ER蛋亡l水平正常对维持‘}1.期lH5’妊娠具有正常作用，若表达水平减少可造成胚胎停止发育，增加流产风险。

　　关键词：孕激素动态监测;孕早期;胚胎发育;异位妊娠

　　中国图书分类号：R173文献标识码：B文章编号：1001-4411( 2018 )10-2310-03;doi:10. 7620/zgfbOhj.j.iSsn. 1001-4411. 2018.1U.48

　　早期异常妊娠对孕妇及家属的身心健康及生活质量有严重不良影响[1]。异位妊娠、先兆流产具有相似的临床病症，常存在下腹疼痛、阴道出血等相关症状，临床诊断难度大，易导致孕妇错过佳治疗时机[2-3]。临床医学针对怀孕7周前的胚胎发育情况经超声难以准确了解，但通过检验技术测定相关激素表达水平能对孕早期的胚胎发育状况进行有效了解，进而及早检出异位妊娠及早期胚胎停育情况，避免出现自然流产[4]。血清催乳素( PRL)、雌二醇(E：)、孕酮等相关孕激素在妊娠维持尤其是孕早期中发挥重要作用，动态监测其表达水平能帮助临床医师预测妊娠结局”。本研究旨在对孕激素动态监测在孕早期胚胎发育诊断中的应用价值进行分析，为临床防治提供参考。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料选取2016年1月-2017年5月在新昌县人民医院就诊的50例因早期胚胎发育终止的孕妇作为研究组，因产生原因不明的少量阴道流咀、小腹疼痛症状，通过B超检查及询问临床病史、观察体征等情况明确宫内胚胎停止发育，年龄25~36岁，平均( 28. 45±2.73)岁;孕周6~10周，平均(8. 53+1. 12)周。同期选择在本院接受人工流产的正常早孕妇50例为对照组，均因避孕失败而自愿接受人工流产;孕妇年龄23~37岁，平均(28. 20±2. 35)岁;孕周5～10周，平均(8.12 +0. 53)周;入选标准：孕妇的既往月经表现规律，无流产、死胎及死产等既往史。6，此次妊娠前存在正常妊娠分娩史;此次妊娠均于本院接受血清hCCJ及B超等相关影像学检查显示为宫内早孕，且孕囊完整;能见显著的原始心管搏动，且胚胎发育正常。两组孕妇的年龄、孕周差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院伦理委员会批准通过，所有孕妇及其家属对本研究均知情并签署同意书。

　　1.2 方法

　　1.2.1 检测母血内PRI.、孕酮及E，表达水平于吸宫术开展前，在孕妇空腹状态下抽取3 ml肘静脉血，经3 000 r/min离心10 min分离m清，采用化学发光免疫分析法对母血内PRL、孕酮及E，表达水平进行检测，所有操作均严格参照说明书执行。

　　1.2.2检测早孕蜕膜内PRI.、孕酮及E，的相关受体PRLR、PR、ER蛋白水平选择免疫组化SP法进行检测，对两组孕妇清官术后获取的新鲜蜕膜组织进行收集，保证术中无污染发生。经负压吸引合理吸出后正确取蜕膜组织，并用0.9%氯化钠溶液快速漂洗，后放人10%甲醛进行24 h固定，后常规开展乙醇脱水，经石蜡包埋，适当制作为4 ym切片，经HE染色(苏木精一伊红染色法)后对蜕膜组织进行观察明确后开展免疫组织染色SP法检测;经pH值6.0的柠檬酸缓冲溶液抗原修复，接受DAB显色，所有操作均严格参照说明书执行一。选择pH值7.4的PBS缓冲液代替一抗为阴性对照，于光镜下观察切片的阳性染色强度、分布，胞浆内产生黄色、棕黄色颗粒为阳性信号，后采用计算机辅助显微图像相关分析系统测定阳性染色处平均光密度值(OD值);随机选择5个视野，并对每个视野显示的阳性强度进行分别计算取平均值，若OD值高则代表蛋白的表达强8。

　　1.3 统计学分析 Excel建立数据库，采用SPSS22.0软件包校对全组数据，计量资料以(i±s)描述，行￡检验;计数资料用[例(%)]描述，行X2检验，P<0. 05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1 两组孕妇血内孕激素表达水平 研究组孕妇血内PRL、孕酮、E：表达水平显著低于对照组孕妇，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

　　表1两组孕妇血内孕激素表达水平(x+s，nmol/L)

　　2.2 两组孕妇蜕膜组织内PRLR、PR及ER蛋白水平免疫组织化学法测定显示，两组孕妇的蜕膜腺体、间质细胞的胞浆内均存在PRLR、PR及ER蛋白阳性表达，且研究组孕妇的蜕膜组织内PRLR、PR及ER蛋白表达水平显著低于对照组孕妇，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

　　表2两组孕妇的蜕膜组织内PRL、孕酮的相关

　　受体PRLR、PR、ER蛋白水平(x+s)

　　3讨论

　　妊娠是一种复杂的生理过程，且多因素参与调节宫内胚胎生长发育，而相关研究发现在妊娠过程中，母体血循环内激素表达水平在维持正常妊娠方面具有重要作用[9];且蜕膜为直接的激素靶器官，而激素相关受体表达水平正常能促使激素正常发挥生理机能，对蜕膜发育具有促进作用，利于受精卵着床、维持胚胎正常发育[10],PRL作为生长激素，是指垂体、垂体外细胞分泌的神经肽类蛋白技术，能参与乳汁合成，并能对细胞免疫、体液免疫进行调节，维持官腔内环境稳定，且利于宫内胚胎的正常生长发育，于蜕膜细胞内存在一定表达，说明PRL在蜕膜局部能经自分泌及旁分泌相关机制引起效应[11-12]。

　　研究显示，PRL对维持黄体、生长因子作用和生殖相关性密切，于胚胎的着床期子宫内膜能合成PRL并经内膜上PRLR给胚泡着床提供合适的微环境，使子宫内膜的容受性提高 [13]。因此，PRL及其受体PRLR为胚泡植入、维持妊娠必不可少的条件，相关研究发现一定水平的PRL对子宫内膜细胞生长、黏附具有促进作用，对着床、胚胎发育具有一定影响作用[14]。而PRLR表达时间模式、位点显示：于靶组织部位PRL能参与调节一系列的和促分化有关的功能，且PRL产生量和子宫内膜的间质细胞蜕膜化相关程度表现为正相关，而孕酮、E：对间质细胞蜕膜化释放PRL具有重要作用。而孕酮又称为黄体酮，为卵巢黄体分泌产生的天然孕激素，存在免疫保护作用，能对免疫反应进行抑制，预防母体排斥胚胎，且孕酮与雌激素一起能维持受精卵着床在宫内，维持正常妊娠，为女性妊娠必备条件[15]。研究发现，怀孕初8周孕酮为黄体产生，而7—9周后逐渐过渡到换成胎盘产生，至10~11周胎盘稳固形成后机体血清孕酮表达水平显著增加，此时胎盘相关滋养细胞能代替黄体释放孕激素，且能维持妊娠。故在孕8周前孕酮水平表现较为恒定，而8周之后不但增高，对临床评估孕早期胚胎发育情况具有重要意义[16-17]。

　　孕酮属于典型的孕激素，于人体机体受孕前多为卵巢分泌，且妊娠初期的表达水平可反映卵巢黄体功能、优势卵泡质量，在孕酮表达水平高于机体的排卵阈值，提示机体的卵巢黄体功能被胎盘替代而保证妊娠状态维持，其中胎盘的胎儿功能是否良好、存活能经孕酮表达水平递增情况反映[18]。研究表明，于妊娠早期，雌激素、孕激素表达水平在正常妊娠维持方面具有相当作用，且在维持黄体期限方面具有重要作

　　用;若激素表达水平降低能导致孕酮对生殖器官作用减弱，孕激素低于1 5 ng/ml，雌激素下降胚胎可能停止，影响胎儿正常发育[19]。本研究结果显示，研究组孕妇的血清PRL、孕酮及E：表达水平均低于对照组，且研究组孕妇的蜕膜组织内PRI.R、PR及ER蛋白表达水平显著低于对照组。提示孕早期胚胎发育异常者的孕激素表达水平低于正常妊娠组，而积极检测机体孕激素表达水皮对临床评估孕早期胚胎发育情况具有重要意义。

　　综上所述，维持孕早期孕妇的血清PRL、孕酮及E：表达水平正常，并维持孕早期蜕膜组织内PRLR、PR、ER蛋白水平正常，对维持早期正常妊娠具有正常作用;若表达水平减少可造成胚胎停止发育，增加流产风险，积极检测孕激素水平对临床评估、维持胚胎发育具有重要作用。

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