做转化时,进行酶连接反应,注意保持低温状态,因为LIGASE酶容易降解。为了安全起见,一般连接3小时,16度;对于含有AMP抗性板的质粒,在加入AMP时注意温度,温度过高,会使克隆无法筛选。我的方法是对烤箱内的细菌进行高温消毒后,烤箱的温度是5