RT-PCR的原理是提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。　　该技术主要用于：分析

PCR实验操作原理：将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;耐热的DNA聚合

PCR引物设计的目的：是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。　　PCR引物设计实验材料：目的基因序列　　PCR引物设计仪器、耗材：电脑

聚合酶链式反应简称PCR，是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR技术发展至今已相当成熟，被

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理：　　琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物

RT-PCR实验原理　　逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是基于从组织或细胞中提取总RNA的原理，以mRNA为模板，采用 Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成 cDNA。以cDNA为模板扩增PCR

　　对照与横断面研究的区别：　　1、按照提供证据的等级来分：病例-对照优于横断面，主要原因是前者(病例-对照)一般选择新发病例，而横断面是某一个时期的所有病例的“普查”了，既有新发、也有现患病例，所以横断面研究也叫横断面调查

免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为：GICT。免疫胶体金技术使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成，而且成本低，不需要特殊的仪器设备。不过在进行免疫胶体金稀释液的配

　　1、琼脂糖凝胶的配制　　根据所需凝胶的浓度秤取琼脂糖，加入相应电泳缓冲液中，用微波炉加热煮沸至琼脂糖完全溶解，加入适量E混匀，适当冷却后倾入凝胶铸槽中，插入梳子，凝胶厚度不超过梳孔，如有气泡产生则用玻璃棒驱除，不能过早拔除梳子，应待凝胶完全

　　磷酸化蛋白的western blot检测操作经验　　蛋白质磷酸化是在蛋白质激酶催化下，把ATP的磷酸基转移到其他蛋白质氨基酸残基。蛋白质磷酸化主要发生在两种氨基酸上，一种是丝氨酸(包括苏氨酸)，另一种是酪氨酸。蛋白质磷酸化是生物体内一种普通

　　四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝,化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐.四唑盐比色法的原理是活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝色产物——甲瓒(formazan),并沉淀在细胞中，而死细胞没有这种功能。二甲亚

质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。那么如何提取质粒呢?步骤有哪些?接下来小编就围绕如何提取质粒的问题为大家整理了一些提取质粒的详细步骤，供大家参考学习!　　质粒的提取 (

       慢病毒纯化和浓缩实验的主要试剂：　　1. 70%乙醇　　2. 20%的蔗糖溶液　　3. PBS缓冲液　　慢病毒纯化和浓缩实验的主要设备：　　1. Ultra-clear SW28离心管　　2

　　原代肝细胞培养技术经验　　肝细胞作为细胞移植治疗慢性肝衰竭的种子细胞以及作为药物筛选的靶细胞，制备和培养大规模的、高活力的肝细胞是这些研究的基本环节。因此肝细胞的分离和培养技术正日益受到人们关注，成为当前研究的热点。今天小编给大家整理了一

肝星状细胞是ECM的主要来源。HSC被激活并转化成肌成纤维细胞样细胞(MFC)。各种成纤维细胞因子均以HSC为终靶细胞，肝星状细胞被激活并转化成肌成纤维细胞样细胞(MFC)。HSC被认为是终的靶细胞。正常情况下，肝星状细胞处于静止状态。那么肝

 Rnase是一种蛋白酶，能够降解RNA。 这个酶高效稳定。要么在DEPC水中处理n小时，要么在160度高温烘烤6小时。此酶才会失效。所谓DEPC，是一种叫做焦碳酸二乙酯的东西。所谓DEPC水，一般指两种状态，a，配制好未消毒;b，配

核酸抽提原则是保证核酸一级结构的完整性、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到低程度、其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除等。　　一、核酸抽提原理　　核酸抽提包含样

　　石蜡切片免疫组化染色实验流程　　免疫组化的方法很多，新方法层出不穷，虽然这些方法各有其特色，但总的来说，只要应用恰当均可获得较为满意的结果。方法的选择并不是影响免疫组化结果的主要因素。今天详细介绍石蜡切片免疫组化染色实验的流程，供大家参考!

细胞凋亡是指由基因控制的细胞自主和有序死亡，以维持体内平衡。细胞凋亡与细胞坏死不同。细胞凋亡不是一个被动的过程，而是一个活跃的过程。它涉及一系列基因的激活、表达和调控。它不是病理条件下的自身损伤现象，而是积极争取更好地适应生活环境的一种死亡过程

载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。主要包括已有载体多克隆位点MCS的改造和已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造。载体构建完成后可利用PCR原理进行测序验证。今天小编整理了了一些关于载体构建的一些心得，供大家参考!　　1、前期准

染色质免疫共沉淀技术的原理是在保持组蛋白和DNA联合的同时，通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体，染色质被切成很小的片断，并沉淀下来。这项技术主要用来分析目标基因有没有活性、或者分析一种已知蛋白(转录因子)的靶基因有哪些。下面小编分享一些

做转化时，进行酶连接反应，注意保持低温状态，因为LIGASE酶容易降解。为了安全起见，一般连接3小时，16度;对于含有AMP抗性板的质粒，在加入AMP时注意温度，温度过高，会使克隆无法筛选。我的方法是对烤箱内的细菌进行高温消毒后，烤箱的温度是5

　　沾染(Contamination)这个词可能许多做过临床研究尤其是做过随机对照临床试验的人都听说过，所谓沾染就是随机对照试验中被分配到对照组的受试者接受了试验组的干预措施，或者试验组的人接受了对照组的干预措施(前者更为多见)。沾染的出现会影

　　这次介绍的书籍是由美国的C.W.迪芬巴赫 G.S.德弗克斯勒主编，主要的内容是：系统介绍常用和经典实验技术以外，特别突出了当前该领域实验手段的新理论、新技术、新发展，为国内专业人员起到借鉴和引导作用;对于每一项实验技术，系统介绍其原理方

          1、方法学的验证         一个标志物(biomarker)或者检查