RT-PCR实验原理逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是基于从组织或细胞中提取总RNA的原理,以mRNA为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。以cDNA为模板扩增PCR
PCR引物设计的目的:是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。PCR引物设计实验材料:目的基因序列PCR引物设计仪器、耗材:电脑
RT-PCR的原理是提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于:分析
RT-PCR引物设计的方法步骤如下:1、在NCBI上搜索到该基因,找到该基因的mRNA,在CDS选项中,找到编码区所在位置,在下面的origin中,Copy该编码序列作为软件查询序列的候选对象。
一、RT-qPCR原理RT-qPCR是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
一、巢式PCR概述巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部)结合在
巢式PCR的优点:1、克服了单次扩增平台期效应的限制,使扩增倍数提高,从而极大的提高了PCR的敏感性;2、由于模板和引物的改变,降低了非特异性反应连续放大进行的可能性,保证了反应的特异性;
一、TounchdownPCR原理TouchdownPCR,即降落PCR。是指每隔一个循环降低1°C或者是0.5°C反应退火温度,直至达到“Touchdown”退火温度,然后以此退火温度进行10个左右的循环。只
PCR-SSCP分析技术是一种基于单链DNA构象差别的快速、敏感、有效地检测基因点突变的DNA多态方法。下面小编就给大家讲一讲PCR-SSCP实验原理及操作的一些流程。一、PCR-SSCP实验原理