RT-PCR实验原理逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是基于从组织或细胞中提取总RNA的原理，以mRNA为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。以cDNA为模板扩增PCR

聚合酶链式反应简称PCR，是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR技术发展至今已相当成熟，被

PCR引物设计的目的：是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。PCR引物设计实验材料：目的基因序列PCR引物设计仪器、耗材：电脑

PCR实验操作原理：将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;耐热的DNA聚合

RT-PCR的原理是提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于：分析

RT-PCR引物设计的方法步骤如下：1、在NCBI上搜索到该基因，找到该基因的mRNA，在CDS选项中，找到编码区所在位置，在下面的origin中，Copy该编码序列作为软件查询序列的候选对象。

一、RT-qPCR原理RT-qPCR是指在PCR反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

一、巢式PCR概述巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部)结合在

巢式PCR的优点：1、克服了单次扩增平台期效应的限制，使扩增倍数提高，从而极大的提高了PCR的敏感性;2、由于模板和引物的改变，降低了非特异性反应连续放大进行的可能性，保证了反应的特异性;

一、TounchdownPCR原理TouchdownPCR，即降落PCR。是指每隔一个循环降低1°C或者是0.5°C反应退火温度，直至达到“Touchdown”退火温度，然后以此退火温度进行10个左右的循环。只

这次介绍的书籍是由美国的C.W.迪芬巴赫G.S.德弗克斯勒主编，主要的内容是：系统介绍常用和经典实验技术以外，特别突出了当前该领域实验手段的新理论、新技术、新发展，为国内专业人员起到借鉴和引导作用;对于每一项实验技术，系统介绍其原理方

PCR-SSCP分析技术是一种基于单链DNA构象差别的快速、敏感、有效地检测基因点突变的DNA多态方法。下面小编就给大家讲一讲PCR-SSCP实验原理及操作的一些流程。一、PCR-SSCP实验原理