NanoLuc标记的重组克里米亚-刚果出血热病毒及其初步用于抗病毒药物筛选
摘要:
目的 为了构建可分泌表达NanoLuc荧光素酶的重组克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV)并探讨其用于抗病毒药物高通量快速初筛的可行性.方法 将NanoLuc基因与CCHFV M节段上的mucin编码框融合,拯救重组病毒,并以利巴韦林为阳性对照,评估Furin抑制剂在体外对重组病毒的抑制效果.结果 成功获得可分泌表达NanoLuc荧光素酶的重组CCHFV(rCCHFV mucin NLuc),且在感染细胞上清中,表示NanoLuc活性的相对光单位(relative light unit,RLU)与病毒半数组织感染剂量(TCID50)呈显著正相关性(cor=0.998,P=0.001).10μmol/L浓度下,Furin抑制剂处理后1~3 d感染细胞上清中NanoLuc荧光素酶活力与利巴韦林处理组无明显差异(P>0.1),但第4天Furin抑制剂处理组上清中RLU值显著高于利巴韦林处理组(P=0.001),且与未处理病毒对照组无明显差异(P>0.1).结论 成功构建1株NanoLuc标记的rCCHFV并可用于抗病毒药物的体外快速初筛.
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doi:
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关键词:
荧光素酶
克里米亚-刚果出血热病毒
抗病毒药物
筛选
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Keyword:
Luciferase
Crimean-Congo hemorrhagic fever virus
Antiviral compound
Screening
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作者:
夏菡
袁志明
Dennis Bente
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Author:
Xia Han
Yuan Zhiming
Dennis Bente
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作者单位:
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刊名:
中华实验和临床病毒学杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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