目的 分析结核分枝杆菌的耐药情况及耐药机制,为临床治疗用药提供指导. 方法 收集2015-2017年就诊结核病患者培养标本,分离结核分枝杆菌,剔除重复菌株.采用纸片扩散法进行药敏试验,根据2015年CLSI标准判定药敏结果.采用PCR扩增目的基因并进行测序,分析耐药基因分布及突变情况. 结果 本研究共分离结核分枝杆菌144株,2015年分离的39株菌株对利福平、对氨基水杨酸钠、氟喹诺酮的耐药率分别为17.95％、20.51％和25.64％,2016年分离的48株菌株耐药率分别为22.9％、12.50％和33.33％,2017年分离的57株菌株耐药率分别为36.84％、10.53％和40.35％.2015年分离株检出rpoB基因3株,thyA基因4株,gyrA基因5株,同时检出rpoB和gyrA基因2株,同时检出rpoB、thyA和gyrA基因1株;2016年分离株检出rpoB基因4株,thyA基因2株,gyrA基因8株,同时检出rpoB和gyrA基因3株,同时检出rpoB、thyA和gyrA基因2株;2017年分离株检出rpoB基因11株,thyA基因2株,gyrA基因12株,同时检出rpoB和gyrA基因5株,同时检出rpoB、thyA和gyrA基因2株.基因测序发现,rpoB基因突变位点主要包括456位C→T、451位C→A以及441位G→T,rpoB基因突变33株,突变率22.92％;thyA基因突变位点主要为19位和168位的C碱基缺失,thyA基因突变13株,突变率9.03％;gyrA基因突变位点主要包括94位A→C/G、90位C→T以及91位C→T,gyrA基因突变40株,突变率27.78％. 结论 结核分枝杆菌对临床常用抗结核药的耐药性与菌株基因突变情况直接相关,rpoB基因、gyrA基因以及thyA基因的突变情况是导致菌株对利福平、氟喹诺酮类药物以及对氨基水杨酸钠耐药的主要原因,但仍存在其他耐药机制.