沙门菌tHDA等温扩增检测方法的建立
摘要:
目的 建立基于依赖耐热解旋酶核酸等温扩增(tHDA)的沙门菌快速检测方法.方法 从GenBank数据库下载沙门菌侵袭蛋白A (invA)基因,比对确定保守区并设计tHDA引物,并对引物浓度、硫酸镁以及氯化钠浓度等反应条件进行优化.同时评价方法的特异性和灵敏度,并检测模拟样本和真实样本以验证方法的可靠性.结果 建立的沙门菌tHDA检测体系经过优化,结果显示仅沙门菌菌株呈现特异性电泳条带,而志贺菌、副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7、霍乱弧菌等其他5种肠道细菌均为阴性,特异性好;tHDA法检测沙门菌纯培养物的灵敏度为19cfu/μl,检测模拟样本的灵敏度为260 cfu/μl.采用tHDA方法检测18份真实样本,共检出9份沙门菌阳性,与国标法检测结果一致.结论 沙门菌tHDA检测方法快速、灵敏、特异,在食源性疾病检测及监测中具有重要的技术优势.
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doi:
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关键词:
依赖耐热解旋酶核酸等温扩增
沙门菌
侵袭蛋白A
分子检测
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Keyword:
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作者:
周冬根
翟敏
罗洁
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Author:
ZHOU Dong-gen
ZHAI Min
LUO Jie
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作者单位:
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刊名:
中国国境卫生检疫杂志
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Journal:
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年,卷(期):
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所属期刊栏目:
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基金项目
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在线出版日期:
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