实验方案案例

2018.11.07 17:10
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  很多新手在科研的实验方案上被卡住了,那实验方案怎么去写呢?想要写实验方案要知道实验目的,然后找合适的试验方法,再设计实验步骤,根据步骤归纳总结所需要的仪器试剂等。下面小编给大家介绍一些实验方案案例,作者可以在写作时参考参考。

  一、实验方案包括

  1.研究内容

  2.研究方法

  3.所需的实验设备和试剂

  4.实验进展安排

  5.经费预算

  二、实验方案案例参考

  病毒包装

  1、慢病毒包装

  使用Clontech公司的Lenti-XTM HTX packaging System第四代慢病毒包装系统。转染前约24 hr,以4-5×106 Lenti-X 293T细胞/100 mm板的密度接种10 ml细胞,培养过夜。按照说明书,将致力DNA转染体系和polymer体系分别混匀,再将两者混合后室温孵育10min后滴加至293T细胞中,十字形摇晃混匀。4小时候换液,继续培养48小时,收获病毒上清,500g离心10min去除细胞碎片,冻存于-80℃待用。Lenti-X GoStix™检测病毒滴度或者按照梯度稀释法,转染293T细胞,根据感染效率判断滴度。

  2、腺病毒/腺相关病毒包装

  取5μg重组质粒用PacI酶切然后胶回收大片段,用TurboFect TMin vitrotransfection Rengent以2μg每孔(6孔板)转染融合度为80-90%的293T细胞包装病毒。转染后24 h,在荧光显微镜下观察绿色荧光数量与分布情况,以跟踪腺病毒的包装与增殖过程;转染6-8 d,局部出现绿色荧光葡萄串样聚集现象;转染10-12天,大量细胞病变变圆脱壁,出现明显的空斑,待约50%细胞从培养容器底部脱落时收集全部培养液与细胞至离心管中,将细胞悬液于-80/37℃反复冻融并涡旋振荡2次,5000g离心5 min,收集上清液,即为第1代病毒悬液。

  用第1代病毒悬液侵染融合度约90%的293A细胞,2-3天后,细胞出现病变,开始变圆脱落,待脱落50%左右,收集细胞按前述方法收集上清液,即为第2代病毒悬液。用第2代病毒悬液再次侵染293T细胞,重复“侵染—冻融—收集”,以大量扩繁病毒和提高病毒滴度。将收集的高滴度病毒悬液用绿色荧光蛋白(GFP)标记法测定病毒滴度。

  关于实验方案的介绍小编就介绍到这里啦,上述的实验方案只截取了资料部分,如果想要查看完整资料,可用过以下方式获取:

  1.注册网站,就可下载

  2.关注微信公众号后联系客服获取

  想要了解更多的资料、信息,可持续关注我们,我们将为大家提供有价值、有需求的材料。为大家在申请基金时省去烦恼。

标签: 实验方案
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